تولید سلولهای پرتوان القاء شده از فیبروبلاست جنینی موشهای نژاد nmri و c57/bl6 با استفاده از سیستم القاء شونده با داکسیسایکلین به منظور تولید موش تراریخت

چکیده فارسی سلولهای پرتوان القایی همانند سلولهای بنیادی توانایی تقسیم نامحدود و تمایز به انواع ردههای سلولی را دارند. این سلولها از بازبرنامه ریزی ژنومی سلولهای تمایز یافته ای بدست می آیند که ژنهای پرتوانی در آنها مجدداً روشن شده است. در این پایان نامه سلولهای ips ای تولید شده است که با سیستم القاء شونده با داکسی سایکلین بیان ژنهای پرتوان خارجی در آن قابل کنترل است. از سلولهای ips تولید شده برای ایجاد موش تراریخت ips استفاده خواهد شد. هدف این است که سلولهای جداشده از بافتهای مختلف موش مذکور را پس از قرار دادن در مجاورت داکسیسایکلین به سلولهای ips تبدیل کرده و در ادامه بازده تولید ips را برای هر بافت مورد ارزیابی قرار داد. به همین منظور ابتدا لنتی ویروسهای بیان کننده ژنهای القایی klf4,sox2,oct4 و c-myc که به صورت پلی سیسترونیک میباشند و ترانس اکتیویتور m2rtta در سلولهای hek 293t تولید شدند. سپس فیبروبلاستهای جنینی موش nmri با این ویروسها آلوده گردیدند. پس از حدود سه هفته کلونیهای بدست آمده به ظرف ??خانه منتقل شده و به منظور تایید پرتوانی آنها ابتدا اجسام شبه جنینی ساخته و دو هفته پس از تمایز خودبه خودی، سلولهای ضرباندار مشاهده شد. کلونهای مذکور به موش nude تزریق گردیده و تشکیل تراتوما در آنها تأیید گردید. پس از تایید پرتوانی وکاریوتایپ کلونها، سلولهای ips به بلاستوسیست موش c57 تزریق شد تا موش کایمر و در نهایت موش تراریخت تولید گردد، که البته این بخش به دلیل کمبود وقت به نتیجه نرسید و در آینده تلاش های بیشتری برای کسب نتایج رضایت بخش انجام خواهد شد. نتایج این تحقیق می تواند در بررسی بازده هر بافت در تولید ips مورد استفاده قرارگیرد. کلمات کلیدی : سلولهای بنیادی القاءشده، موش تراریخت، القاءشونده